SchnellNachweis des Virus der Afrikanischen Schweinepest

„Wir haben eine Zelllinie identifiziert, mit der ein lebendes Virus isoliert und nachgewiesen werden kann“, sagte ARS-Wissenschaftler Dr. Douglas Gladue.„Dies ist ein großer Durchbruch und ein großer Fortschritt bei der Diagnose des Virus der Afrikanischen Schweinepest.“
Derzeit gibt es keinen Impfstoff gegen ASP, und die Ausbruchsbekämpfung hängt häufig von der Isolierung und Entfernung infizierter oder exponierter Tiere ab.Bisher war für den wirksamen Nachweis lebender ASP-Viren die Entnahme von Blutzellen von lebenden Spenderschweinen für jeden diagnostischen Test erforderlich, da die Zellen nur einmal verwendet werden können.Neue Zelllinien können kontinuierlich repliziert und für die zukünftige Verwendung eingefroren werden, wodurch die Anzahl der benötigten lebenden Spendertiere reduziert wird.
Die neue Zelllinie könnte auch in veterinärmedizinischen Diagnoselabors eingesetzt werden, die traditionell keinen Zugang zu Schweineblutzellen haben, die zum Nachweis lebender ASP-Viren erforderlich sind.
Der Studie zufolge wurde die Diagnose von ASP in klinischen Proben (hauptsächlich Vollblut) mithilfe der Echtzeit-Polymerase-Kettenreaktion (RT-PCR) durchgeführt, einem molekularen Test, der einen kleinen Teil des viralen Genoms nachweisen kann, aber keine lebenden Infektionen nachweisen kann Virus..Die Virusisolierung ist erforderlich, um eine aktive Infektion und eine anschließende Analyse, wie beispielsweise die Sequenzierung des gesamten Genoms, zu bestätigen.Derzeit ist die Virusisolierung nur mit primären Schweinemakrophagen möglich, die in den meisten regionalen Veterinärdiagnostiklaboren selten verfügbar sind.Die Produktion primärer Schweinemakrophagen ist zeitaufwändig und arbeitsintensiv, da Zellen aus Schweineblut gesammelt oder Zellen aus der Lunge isoliert werden müssen.Frühere Studien haben gezeigt, dass sich das ASF-Virus in etablierten Zelllinien repliziert, nachdem sich das Virus an eine bestimmte Zelllinie angepasst hat, normalerweise nach einem seriellen Passagierungsprozess.Bisher konnte nicht gezeigt werden, dass reife, im Handel erhältliche Zelllinien für die Isolierung des ASP-Virus anhand von Feldproben geeignet sind.
In dieser Studie identifizierten die Forscher eine Zelllinie, die den Nachweis unterstützen kannASFVin Feldproben mit einer TCID50-Empfindlichkeit, die mit der von primären Schweinemakrophagen vergleichbar ist.Ein sorgfältiges Screening kommerziell erhältlicher Zelllinien hat zur Identifizierung von MA-104-Zellen der Afrikanischen Grünen Meerkatze als Ersatz für primäre Schweinemakrophagen für die Isolierung des ASP-Virus geführt.
Seit seinem Auftreten in der Republik Georgien im Jahr 2007 kam es außerhalb des afrikanischen Kontinents zu jüngsten Ausbrüchen des ASP-Virus. Die Krankheit hat sich kürzlich auf China und Länder in Südostasien ausgebreitet, darunter die Mongolei, Vietnam, Kamerun, Nord- und Südkorea sowie Laos , Myanmar, Philippinen, Timor-Leste, Indonesien, Papua-Neuguinea und Indien.Der aktuelle Ausbruch des Stammes „Georgia“ ist hoch ansteckend und für Hausschweine tödlich, mit einer Sterblichkeitsrate von bis zu 100 %.Obwohl das Virus in den Vereinigten Staaten derzeit nicht vorkommt, könnte die US-amerikanische Schweineindustrie im Falle eines Ausbruchs erhebliche wirtschaftliche Verluste erleiden.