Verwendungszweck

Der Dengue-NS1-Ag-IgG/IgM-Kombinationstest ist ein schneller chromatographischer Immunoassay zum qualitativen Nachweis von Antikörpern (IgG und IgM) und dem Dengue-Virus-NS1-Antigen gegen Dengue-Virus in Serum oder Plasma, um die Diagnose einer Dengue-Virusinfektion zu unterstützen.

[ZUSAMMENFASSUNG]

Dengue-Fieber ist eine akute, durch Vektoren übertragene Infektionskrankheit, die durch das von Mücken übertragene Dengue-Virus verursacht wird.Eine Dengue-Virus-Infektion kann zu einer rezessiven Infektion, Dengue-Fieber, hämorrhagischem Dengue-Fieber und hämorrhagischem Dengue-Fieber führen.Zu den typischen klinischen Manifestationen des Dengue-Fiebers gehören plötzliches Auftreten, hohes Fieber, Kopfschmerzen, starke Muskel-, Knochen- und Gelenkschmerzen, Hautausschlag, Blutungsneigung, Lymphknotenvergrößerung, verringerte Anzahl weißer Blutkörperchen, Thrombozytopenie usw. bei einigen Patienten.Diese Krankheit erfreut sich vor allem in tropischen und subtropischen Gebieten großer Beliebtheit, da diese Krankheit durch Aides-Mücken übertragen wird. Der Grund dafür ist, dass die Beliebtheit saisonal bedingt ist und jedes Jahr in der Regel im Mai bis November auftritt, wobei der Höhepunkt im Juli bis September liegt.Im neuen Epidemiegebiet ist die Bevölkerung im Allgemeinen anfällig, die Inzidenz betrifft jedoch hauptsächlich Erwachsene, im Endemiegebiet sind es hauptsächlich Kinder.

Prinzip

Der Dengue-NS1-Ag-IgG/IgM-Kombitest ist ein qualitativer, auf Membranstreifen basierender Immunoassay zum Nachweis von Dengue-Virus-Antikörpern (IgG und IgM) und Dengue-Virus-NS1-Antigenen in Serum oder Plasma.

Für den IgG/IgM-Test: Das Testgerät besteht aus: 1) einem burgunderfarbenen Konjugatpad, das rekombinante Dengue-Hüllantigene enthält, die mit kolloidalem Gold konjugiert sind (Dengue-Konjugate), 2) einem Nitrozellulosemembranstreifen mit zwei Testlinien (T1- und T2-Linien) und eine Kontrolllinie (C-Linie).Die T1-Linie ist mit dem Antikörper zum Nachweis von IgM-Anti-Dengue-Fieber vorbeschichtet, die T2-Linie ist mit Antikörper zum Nachweis von IgG-Anti-Dengue-Fieber beschichtet.Wenn ein ausreichendes Volumen der Testprobe in die Probenvertiefung der Testkassette gegeben wird, wandert die Probe durch Kapillarwirkung durch die Kassette.IgG-Anti-Dengue-Fieber, sofern in der Probe vorhanden, bindet an die Dengue-Konjugate.Der Immunkomplex wird dann von dem auf der T2-Bande vorbeschichteten Reagenz eingefangen und bildet eine burgunderfarbene T2-Linie, die auf ein Dengue-IgG-positives Testergebnis hinweist und auf eine kürzliche oder wiederholte Infektion hinweist.IgM-Anti-Dengue-Fieber, sofern in der Probe vorhanden, bindet an die Dengue-Konjugate.Der Immunkomplex wird dann von dem auf der T1-Linie beschichteten Reagenz eingefangen und bildet eine burgunderfarbene T1-Linie, die auf ein positives Dengue-IgM-Testergebnis und eine frische Infektion hinweist.Das Fehlen jeglicher T-Linien (T1 und T2) deutet auf ein negatives Ergebnis hin.

Für den NS1-Test: Bei diesem Testverfahren wird der Anti-Dengue-NS1-Antikörper im Testlinienbereich der Kassette immobilisiert.Nachdem eine Vollblut-/Serum-/Plasmaprobe in die Probenvertiefung gegeben wurde, reagiert sie mit den mit Anti-Dengue-NS1-Antikörpern beschichteten Partikeln, die auf das Probenpad aufgetragen wurden.Diese Mischung wandert chromatographisch entlang des Teststreifens und interagiert mit dem immobilisierten Anti-Dengue-NS1-Antikörper.Wenn die Probe das Dengue-Virus-NS1-Antigen enthält, erscheint im Testlinienbereich eine farbige Linie, die auf ein positives Ergebnis hinweist.Wenn die Probe kein Dengue-Virus-NS1-Antigen enthält, erscheint in diesem Bereich keine farbige Linie, was auf ein negatives Ergebnis hinweist.

Um als Verfahrenskontrolle zu dienen, erscheint immer eine farbige Linie im Kontrolllinienbereich, die anzeigt, dass das richtige Probenvolumen hinzugefügt wurde und eine Dochtwirkung durch die Membran stattgefunden hat.

Lagerung und Stabilität

Wie verpackt im versiegelten Beutel bei Raumtemperatur oder gekühlt (4–30 °C oder 40–86 °F) lagern.Das Testgerät ist bis zum auf dem versiegelten Beutel aufgedruckten Verfallsdatum haltbar.

Der Test muss bis zur Verwendung im versiegelten Beutel bleiben.

Probenentnahme und -vorbereitung

1. Der Dengue NS1 Ag-IgG/IgM-Kombitest kann mit Serum oder Plasma durchgeführt werden.

2. Zur Entnahme von Vollblut-, Serum- oder Plasmaproben gemäß den regulären klinischen Laborverfahren.

3. Der Test sollte unmittelbar nach der Probenentnahme durchgeführt werden.Lassen Sie die Proben nicht über einen längeren Zeitraum bei Raumtemperatur liegen.Für eine Langzeitlagerung sollten die Proben unter -20 °C aufbewahrt werden.

4. Bringen Sie die Proben vor dem Test auf Raumtemperatur.Gefrorene Proben müssen vor dem Test vollständig aufgetaut und gut gemischt werden.Proben sollten nicht wiederholt eingefroren und aufgetaut werden.

Testprozedur

Lassen Sie den Test, die Probe, den Puffer und/oder die Kontrollen vor dem Testen Raumtemperatur von 15–30 °C (59–86 °F) erreichen.

1. Bringen Sie den Beutel vor dem Öffnen auf Raumtemperatur.Nehmen Sie das Testgerät aus dem versiegelten Beutel und verwenden Sie es so bald wie möglich.Stellen Sie das Testgerät auf eine saubere und ebene Fläche.

2. Für den IgG/IgM-Test: Halten Sie die Pipette senkrecht und geben Sie 1 Tropfen Probe (ca. 10 μl) in die Probenvertiefung (S) des Testgeräts, geben Sie dann 2 Tropfen Puffer (ca. 70 μl) hinzu und starten Sie den Timer.Siehe Abbildung unten.

3. Für den NS1-Test: Halten Sie die Pipette senkrecht und geben Sie 8 bis 10 Tropfen Serum oder Plasma (ca. 100 μl) in die Probenvertiefung(en) des Testgeräts. Starten Sie dann den Timer.Siehe Abbildung unten.

4. Warten Sie, bis die farbigen Linien angezeigt werden.Lesen Sie die Ergebnisse nach 15 Minuten ab.Interpretieren Sie das Ergebnis nicht nach 20 Minuten.

Interpretation der Ergebnisse

Positiv:

Für den IgG/IgM-Test: Auf der Membran erscheinen eine Kontrolllinie und mindestens eine Testlinie.Das Erscheinen der T2-Testlinie weist auf das Vorhandensein von Dengue-spezifischen IgG-Antikörpern hin.Das Erscheinen der T1-Testlinie weist auf das Vorhandensein von Dengue-spezifischen IgM-Antikörpern hin.Wenn sowohl die T1- als auch die T2-Linie erscheinen, weist dies auf das Vorhandensein sowohl Dengue-spezifischer IgG- als auch IgM-Antikörper hin.Je niedriger die Antikörperkonzentration ist, desto schwächer ist die Ergebnislinie.

Für den NS1-Test: Es werden zwei Zeilen angezeigt.Eine Linie sollte immer im Kontrolllinienbereich (C) erscheinen und eine weitere sichtbare farbige Linie sollte im Testlinienbereich erscheinen.

Negativ:

Im Kontrollbereich (C) erscheint eine farbige Linie. Im Testlinienbereich erscheint keine erkennbare farbige Linie.

Ungültig: Die Kontrolllinie wird nicht angezeigt.Unzureichendes Probenvolumen oder falsche Verfahrenstechniken sind die wahrscheinlichsten Gründe für ein Versagen der Kontrolllinie.Überprüfen Sie den Vorgang und wiederholen Sie den Test mit einem neuen Testgerät.Wenn das Problem weiterhin besteht, stellen Sie die Verwendung des Testkits sofort ein und wenden Sie sich an Ihren örtlichen Händler.